实时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差，提高实验的重复性,无需电泳,具有快速及能定量等特点而倍受青睐。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化、比较不同组织的mRNA 表达差异、验证基因芯片和siRNA干扰的实验结果。

本公司承接利用Real Time PCR法进行课题研究的技术服务，可从引物设计合成开始，至Real Time PCR反应检测的一条龙技术服务。

— 服务项目

绝对定量

相对定量

构建标准品

— 检测方法

 SYBR Green 染料法

Taqman探针法

— 服务内容

引物设计（价格另计）、合成（客户自费）

DNA or RNA提取

制作标准曲线。

使用设计合成的引物，以客户提供的Total RNA样品为模板，进行Real Time PCR反应，确认引物模板的反应性能。然后将模板进行5个浓度梯度稀释，制作标准曲线，以供进一步定量分析使用。

Real Time PCR反应及定量分析

对客户提供的样品进行Real Time RT-PCR反应，并进行定量分析。用相对定量方法进行定量分析时，如客户需要，可对管家基因等参比基因进行同样操作，用所得到的值进行RNA量的校正，最后求得目的基因的相对表达量。

— 样本要求

进行mRNA表达量分析时，请保证所送样本是足量的并且保证纯度的Total RNA（浓度在100 ng/ml以上，体积在20ul以上)。如果目的基因表达量低时，应尽量提供更高浓度的Total RNA。

如果提供的材料为细胞或组织，DNA、RNA的提取费用另收。同时应保证材料新鲜，动物细胞数为106以上，动植物组织为50mg以上。

— 终产品

qPCR引物及其序列(包括探针)；

完整的实验报告